淋球菌實(shí)驗(yàn)室檢查包括涂片,培養(yǎng)檢查淋球菌、抗原檢測,藥敏試驗(yàn)及PPNG測定,基因診斷。
(一)涂片檢查:
取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭氏陰性
雙球菌。涂片對有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者,此法陽性率在90%左右,可以初步診斷。女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽性率僅為50-60%,且有假陽性,因此世界衛(wèi)生組織推薦用培養(yǎng)法檢查女病人。慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。
咽部涂片發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病,因?yàn)槠渌紊鷮僭谘什渴钦5木骸A硗鈱ΠY狀不典型的涂片陽性應(yīng)作進(jìn)一步檢查。
(二)培養(yǎng)檢查:
淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證,培養(yǎng)法對癥狀很輕或無癥狀的男性、女性病人都是較敏感的方法,只要培養(yǎng)陽性就可確診,在基因診斷問世以前,培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的唯一方法。目前國外推薦選擇培養(yǎng)基有改良的Thayer-Martin(TM)培養(yǎng)基和New York City(NYC)培養(yǎng)基。國內(nèi)采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細(xì)菌生長。在36℃,70%濕度,含5%-10%CO2(燭缸)環(huán)境中培養(yǎng),24-48小時觀察結(jié)果。培養(yǎng)后還需進(jìn)行菌落形態(tài),革蘭氏染色,氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)等鑒定。培養(yǎng)陽性率男性80%-95%,女性80-90%。
(三)抗原檢測
1.固相酶免疫試驗(yàn)(EIA):可用來檢測臨床標(biāo)本中的淋球菌抗原,在流行率很高的地區(qū)而又不能作培養(yǎng)或標(biāo)本需長時間遠(yuǎn)送時使用,可以在婦女人群中用來診斷淋球菌感染。
2.直接免疫熒光試驗(yàn):通過檢測淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免
疫熒光試驗(yàn)。但目前在男女二性標(biāo)本的敏感不高,特異性差,加之實(shí)驗(yàn)人員的判斷水平,故該實(shí)驗(yàn)尚不能推薦用來診斷淋球菌感染。
(四)基因診斷
1.淋球菌的基因探針診斷
淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質(zhì)粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。
2、淋球菌的基因擴(kuò)增檢測
上面講述的探針技術(shù)檢測淋球菌的方法,雖然比培養(yǎng)方法在靈敏度,特異性和方便性上有了很大的提高,但其仍有一定的局限性,如多數(shù)情況下需要標(biāo)本的淋球菌濃度很高,PCR技術(shù)和連接酶鏈反應(yīng)的出現(xiàn)進(jìn)一步提高了檢測淋球菌的靈敏性,它具有快速、靈敏、特異、簡便的優(yōu)點(diǎn),可以直接檢測臨床標(biāo)本中極微量的病原體。
3.臨床基因診斷淋球菌的注意事項(xiàng)
目前臨床檢測淋球菌的基因診斷方法主要采用PCR方法。PCR方法與LCP方法比傳統(tǒng)的培養(yǎng)法在靈敏性和特異性上有了很大的提高,時間也大大縮短。隨著基因診斷技術(shù)的不斷改進(jìn)。PCR方法與LCP方法在淋球菌的檢測將會成為常規(guī)的檢測方法。
(五)藥敏試驗(yàn):在培養(yǎng)陽性后進(jìn)一步作藥敏試驗(yàn)。用紙片擴(kuò)散法做敏感試驗(yàn),或用瓊脂平皿稀釋法測定最小抑菌濃度(MIC),用以指導(dǎo)選用抗生素。
(六)PPNG檢測:β-內(nèi)酰胺酶,用紙片酸度定量法,使用Whatman I號濾紙PP-NG菌株能使其顏色由藍(lán)變黃,陽性為PPNG,陰性為N-PPNG。
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